四倍体刺槐扦插繁殖方法  

 扦插生根是常规采用的植物繁殖方法，但是对一些难以扦插生根成活的植物除了用生长素和某些药物处理外，还常常采用黄化处理插穗，进行植物繁殖。黄化处理，是促进插穗生根的一种措施，此处理将枝梢的基部裹罩，遮住光线一定时间后剪下扦插，使多数原来不易用扦插繁殖的品种经处理后都能生根成活。枝条经黄化处理后，叶绿素消失、组织黄化、皮层增厚、薄壁细胞增多，有利根原基的分化和生根，其原因是黄化部位增加了内源IAA，减少了被认为有抑制生根作用的物质产生。

 1)选取和修剪硬枝枝条

 每年10月末选取一年生健壮枝条，修剪掉侧枝，剪成枝段，获得硬枝枝段；

 2)冬季沙藏处理

 首先，将硬枝枝段浸泡于植物生长调节剂中，进行第一次植物生长调节剂处理，然后将枝段摆放在沙藏池内，进行越冬保藏；

 3)催芽处理

 第二年3月上旬，将经过冬季沙藏处理的硬枝枝段平放在催芽池中，并在其上覆盖湿粗沙，进行催芽处理，枝段催芽生长出嫩枝；

 4)扦插和生根培养

 首先，将催芽嫩枝基部迅速蘸取植物生长调节剂，进行第二次植物生长调节剂处理，然后将蘸取生长调节剂的嫩枝扦插于扦插基质内，进行生根培养。其中， 硬枝枝段的直径为10-20mm，枝段长度为10-30cm。特别是，硬枝枝段直径≥15mm，枝段修剪成长度为10-20cm；硬枝枝段直径为10-15mm，枝段修剪成长度为20-30cm。尤其是，硬枝枝段的下端修剪成马蹄形斜切面，上端为平切面，上、下切口距芽0.5cm。

 植物生长调节剂选择吲哚丁酸、萘乙酸、生根粉中的一种或多种，优选为吲哚丁酸。

 第一次植物生长调节剂浸泡处理时间为3-5min，优选为5min；植物生长调节剂的浓度为100-200mg/kg。

  越冬保藏的温度为0-7℃，相对湿度为70％-80％。特别是，冬季沙藏处理的时间是指从每年的10月末至第二年的3月上旬。其中，枝段冬季沙藏处理过程中枝段垂直摆放在沙藏池中，进行所述沙藏处理。特别是，将经过第一次植物生长调节剂处理的四倍体刺槐硬枝枝段的上端朝上、下端朝下，垂直放于沙藏池中，越冬保藏。沙藏池是底部铺有碎石块和湿粗沙，顶部用湿粗沙覆盖，最上层覆塑料薄膜的土坑。碎石块、湿粗沙采用多菌灵溶液进行灭菌消毒。其中，多菌灵溶液中水与多菌灵的质量之比为2000∶1；多菌灵溶液与碎石块的质量之比为1∶9-11；多菌灵溶液与湿粗沙的质量之比为1∶9-11。湿粗沙的厚度为1-7cm，优选为2-4cm；湿粗沙的含水率为70％-80％，粒径≥2mm；黄化催芽处理的温度为10-30℃，优选为12-30℃；相对湿度为70％-90％，优选为75％-80％。将经过冬季沙藏处理的硬枝枝段平放在催芽池中，相邻两个硬枝枝段间隔1-3cm，覆盖湿粗沙后，进行所述的黄化催芽处理。

生长调节剂选择吲哚丁酸。浓度优选为2000mg/kg；蘸取生长调节剂的时间优选为30s；催芽嫩枝基部蘸取植物生长调节剂高度为≥2cm。

催芽嫩枝的长度为12-15cm，直径≥5mm。修剪去除催芽嫩枝下端的叶片，保留上部的叶片，去除的叶片量占嫩枝总叶量的1/2。扦插生根培养温度为15-30℃，相对湿度为70％-90％。通过加盖遮阳网进行所述的温度调节；通过自动喷雾装置调节扦插生根培养的相对湿度。

扦插和生根培养处理15天后，采用通风、减少喷水量、增强光照强度等措施炼苗。

扦插床的基质为腐熟牛粪和细沙土混合物，已腐熟的牛粪与细沙土的体积之比为2∶1。已腐熟的牛粪、细沙土分别用多菌灵溶液进行灭菌，然后混合，多菌灵溶液与已腐熟的牛粪、细沙土的质量之比为1∶10。多菌灵溶液中水与多菌灵的质量之比为2000∶1；所述细沙土的粒度≥1mm，含水率为70％-80％。

 四倍体刺槐硬枝繁殖方法的优点：

 采用植物生长调节剂处理四倍体刺槐硬枝枝段，并结合越冬沙藏处理，提高了枝段的含水率，促进了糖、氮化合物的转化，有利于消除枝段体内的生根抑制物质，提高呼吸强度，提高细胞的分化能力，促进愈伤组织的形成，有利于催芽时枝段对水分的吸收和自身营养的利用。

 将刺槐硬枝枝段覆盖在沙中，枝段沙埋催芽处理，嫩枝叶片嫩黄、组织和嫩枝基部黄化、皮层增厚、薄壁细胞增多，利于根原基的分化和生根，提高了四倍体刺槐扦插繁殖效率、生根数、生根长度、生根率和成活率，较传统埋干催芽处理的催芽数量提高2倍以上，繁殖系数提高2倍以上。

 采用高浓度植物生长调节剂处理黄化嫩枝基部，提高了嫩枝的生根数量，生根长度及生根率，成活率达到90.0％以上；与未进行生长调节剂处理嫩枝直接扦插相比，生根数量提高了1.2倍以上，生根长度增加了61.9％以上，生根率提高了1.9倍以上。

采用生长调节剂浸泡枝段处理结合越冬沙藏处理的生根效果远远优于普通沙藏处理，比普通沙藏处理相比生根率提高了43.1％，生根数量提高了65％，生根长度增加了49.5％。生根效果好于传统的沙藏层积处理方法。

扦插方法采用沙埋枝段处理进行催芽，覆沙催芽嫩枝扦插的生根长度、生根数量、生根率显著高于基部未黄化的嫩枝，比基部未黄化嫩枝扦插处理的生根率提高了18.9％，生根数量提高了59.7％，生根长度增加了37.4％。

 繁殖方法采用冬季沙藏处理保持了枝段的水分，维持枝段的萌发性能，同时，沙藏池中的玉米秸秆束可以与外界通气，防止枝段沙藏过程中发热霉烂，是一种简单、廉价、高效的贮藏方法。 

 地温棚分为催芽温棚和扦插温棚。催芽温棚为水泥骨架，单面坡向南，棚内建催芽池，铺设自动喷雾装置；扦插温棚为毛竹骨架小棚，棚内铺设自动喷雾装置，棚外顶部架设喷水降温设施。

 四倍体刺槐硬枝采自上述苗圃的四倍体刺槐采穗圃，为四倍体刺槐一年生健壮、无病虫害枝条，枝条的直径为10-20mm。

 灭菌湿粗沙：湿粗沙的含水率为70％-80％，粒径≥2mm；湿粗沙采用2000倍多菌灵(其中，水和多菌灵质量之比为2000∶1)溶液均匀喷洒后，搅拌均匀，2000倍多菌灵溶液与湿粗沙的质量之比为1∶9-11，以防各种病菌侵染沙藏枝段造成生菌腐烂。

 灭菌碎石块：采用2000倍多菌灵(其中，水和多菌灵质量之比为2000∶1)溶液均匀喷洒后，搅拌均匀，2000倍多菌灵溶液与碎石块的质量之比为1∶9-11，以防各种病菌侵染沙藏枝段造成生菌腐烂。

 灭菌玉米秸秆：采用2000倍(水和多菌灵质量之比为2000∶1)多菌灵均匀喷洒玉米秸秆表面处理，直到玉米秸秆表面均匀覆盖多菌灵溶液为止。

 植物生长调节物质可采用的国产吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)和中国林业科学院的生根粉1号(ABT)。

 一、刺槐硬枝的采集和第一次生长调节剂处理

 1)于当年10月末，待四倍体刺槐停止生长、落叶后，剪取一年生健壮、无病虫害枝条，修剪除去枝条的侧枝，枝条直径为10-20mm，其中，将枝段直径≥15mm的修剪成10-20cm枝段，枝段直径在10-15mm的修剪成20-30cm枝段，并将枝段的下端修剪成马蹄形斜切面，上端为平切面，上、下切口距芽0.5cm，枝段的直径为10-20mm；

  2)将修剪后的插穗每30根绑成一捆，形成枝段捆，其中，枝段捆中枝段的下端与上端严格分开，即所有枝段的下端位于枝段捆的一端，所有枝段的上端位于枝段捆的另一端；

  3)将枝段捆完全浸泡于生长调节剂吲哚丁酸(IBA)溶液中，进行第一次生长调节剂处理，枝段浸泡5min后取出，生长调节剂溶液的浓度为200mg/kg。

 二、冬季沙藏

 1、准备沙藏池：

 在温室外，选择背风向阳的地方，挖土坑作为沙臧池，其中沙藏池池深1m，面积根据枝段数量而定，沙藏池的最下层铺厚度为5-10cm的经多菌灵灭菌的碎石块；然后在碎石层的上面再铺一层厚度为10cm的经多菌灵处理的灭菌湿粗沙，备用；

 2、沙藏处理：

将经过第一次生长调节剂处理的枝段迅速放入沙藏池内进行沙藏处理，其中枝段上端朝上、下端朝下垂直放于沙藏池的湿粗沙的上面，在沙藏池的四个角上和沙藏池的中央分别垂直放置一束灭过菌的玉米秸秆，使埋藏的枝段可以与外界通气，防止枝段发热造成霉烂；

在枝段的上面覆盖一层经多菌灵处理的灭菌湿粗沙，湿粗沙表面用铁锨拍打压实，不留空隙，湿粗沙层的厚度为20cm，然后在沙藏池的最上层覆盖塑料薄膜，以保温保湿，其中，沙藏池的温度保持为0-7℃，相对湿度为70％-80％。

三、催芽处理

1、准备催芽池

在催芽温棚内的地面上挖宽2m、深0.4m的催芽池，催芽池的长度根据枝段数量而定；

催芽池上部铺设自动喷雾装置，催芽池的底部铺上5-10cm厚的多菌灵灭菌的碎石块，在碎石块上面铺10cm厚的多菌灵灭菌的湿粗沙；

2、枝段灭菌处理

 在第二年3月上旬，取出冬季沙藏处理的硬枝枝段，用2000倍多菌灵(水和多菌灵质量比为2000∶1)溶液均匀喷洒枝段，进行枝段灭菌处理，重复喷洒直到枝段表面均匀覆盖多菌灵溶液为止；

 3、沙埋枝段催芽

首先将灭菌枝段水平放置均匀摆放在催芽池的湿粗沙上，每个枝段之间间隔1-3cm；接着在枝段上覆盖2cm厚的多菌灵灭菌湿粗沙，适时喷水，保持催芽池内的相对湿度，进行催芽处理，其中，催芽处理过程中，催芽温棚的温度在12-30℃之间，相对湿度为75％-80％。

四、扦插处理

1、准备扦插基质

将已腐熟的牛粪、细沙土分别用2000倍多菌灵(水和多菌灵质量比为2000∶1)溶液均匀喷洒，搅拌均匀，以防各种病菌侵染沙藏枝段而造成生菌腐烂，其中，2000倍多菌灵溶液与已腐熟的牛粪、细沙土的质量之比为1∶10，细沙土粒度≥1mm，含水率为70％-80％；

 将多菌灵灭菌的已腐熟的牛粪与细沙土混合均匀，作为扦插基质，装入营养杯中，营养杯紧密摆放在试验地的扦插温棚内，备用，其中，营养杯的规格为8cm×8cm，已腐熟的牛粪与细沙土的体积之比为2∶1。

2、嫩枝处理

 在第二年的4月上旬，待催芽池中的硬枝枝段萌生的嫩枝生长至12-15cm，直径≥5mm时，将嫩枝带芽基从枝段着生处剪下或掰下，修剪去除嫩枝下端的叶片，保留上部的叶片，去除的叶片量占嫩枝总叶量的1/2，得到催芽嫩枝备用；

 将催芽嫩枝基部迅速蘸取植物生长调节剂吲哚丁酸(IBA)，其中IBA溶液处理的浓度为2000mg/kg，蘸取时间为30s，催芽嫩枝基部蘸取的深度2cm。

3、扦插处理

 将处理后的嫩枝插穗扦插于营养杯中，每个营养杯中扦插1个基部黄化的插穗，插穗在营养杯中进行生根培养；

 扦插后在扦插温棚上覆盖遮阳网遮阴，同时利用扦插温棚的自动喷雾装置进行喷水雾，以保持叶面湿润，中午勤喷(10分钟左右喷一次，每次喷5-10s左右)，早晨、下午少喷，晚上停喷，扦插温棚内的温度保持在15-30℃内，相对湿度为70％-90％；

 扦插11天后，逐渐减少喷水次数，扦插15天后，主要是采用通风、减少喷水量、增强光照强度等措施开始炼苗，同时测量插穗的生根长度、生根数量，计算生根率。

 除了催芽处理过程中沙埋枝段催芽步骤在枝段上覆盖4cm厚的湿粗沙，其余相同。

 扦插15天后，主要是采用通风、减少喷水量、增强光照强度等措施开始炼苗，同时测量插穗的生根长度、生根数量，计算生根率 。